pcr實驗室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范

聚合酶鏈鎖反應(yīng)，Polymerase chain reaction，簡稱PCR，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于擴增特定的DNA片段，這種方法可在生物體外 進行，不必依賴大腸桿菌或酵母菌等生物體。PCR這項技術(shù)，被廣泛地運用在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)的實驗室，例如用于判斷檢體中是否會表現(xiàn) 某遺傳疾病的圖譜、傳染病的診斷、基因復(fù)制，以及親子鑒定。下面四川精工誠帶你看看pcr實驗室建設(shè)標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范。

一）PCR實驗室平面布局

PCR實驗室原則上分為4個單獨的工作區(qū)域，由擴增前區(qū)到擴增后區(qū)，且要嚴(yán)格分開。實驗材料、試劑、記錄筆、紙、清潔材料等，只能從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，即從試劑制備區(qū)–樣品制備區(qū)—擴增區(qū)—擴增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴增前區(qū)流動到擴增后區(qū)，不得逆向流動。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝聯(lián)鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區(qū)應(yīng)是分隔獨立的工作室，并有明顯的標(biāo)志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連，需安裝物品 傳遞窗。每個工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長為254nm。

實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊，試劑制備區(qū)，樣品制備區(qū)，擴增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范的排列在一起。內(nèi)實驗室區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)，使這三個區(qū)的空氣流向由實驗區(qū)域內(nèi)向外，緩沖間內(nèi)通向內(nèi)實驗室和走廊的門可安一種聯(lián)鎖裝置，當(dāng)一個門打開時，另一門必須關(guān)閉狀態(tài)，防止出現(xiàn)兩個門同時打開的情況。

二）各區(qū)的功能及主要設(shè)備

試劑制備區(qū)主要是擴增試劑的配制，分裝盒保存。主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機、加樣器、紫外燈。
樣品制備區(qū)主要是樣品的混樣和測試樣品的制備。主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴、上下水設(shè)備、廢棄物容器、紫外燈。根據(jù)制備樣品的性質(zhì)和要求決定操作臺是用生物安全柜、凈化工作臺、還是排毒柜，如疾控中心、臨床醫(yī)學(xué)實驗室一般選用生物安全柜，植物轉(zhuǎn)基因、檢疫等可選排毒柜。
擴增區(qū)是pcr擴增反應(yīng)體系的配制和模板的加入，核酸擴增。加樣應(yīng)在生物安全柜（超凈工作臺）內(nèi)進行，超凈工作臺的氣流方向宜選擇垂直式。核酸擴增設(shè)備為冰箱、生物安全柜、離心機加樣器、廢棄物容器、紫外燈。
擴增產(chǎn)物分析區(qū)是擴增產(chǎn)物的測定。若實驗僅采用全自動擴增檢測儀，可將 區(qū)與擴增產(chǎn)物分析區(qū)合并為一個區(qū)。本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。

三）實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制

各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗室之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為了避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送排的氣流組織形式。

四）實驗室裝修

實驗室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用弧形線條過濾；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。地面建議使用PVC卷材地面或自流平地面，整體性好，便于進行清掃，耐腐蝕。